GFP(緑色蛍光タンパク質)を用いたウイルス研究

2016年から2020年の間に発表された、GFPタンパク質とクロモテックのGFP-Trap®を使用したウイルス研究の文献を紹介します。

公開文献の抜粋(2016年~2020年)

本稿では、2016年から2020年の4年間に発表された、ウイルスを研究対象として緑色蛍光タンパク質(GFP:Green fluorescent protein)を用いた論文を紹介します。多くの論文は、ウイルスタンパク質が結合する宿主細胞のパートナータンパク質を同定するために、GFP融合タンパク質に対して免疫沈降(IP:Immunoprecipitation)や共免疫沈降(Co-IP:Co-immunoprecipitation)を実施したことを報告しています。その他の論文では、質量分析(MS:Mass spectrometry)法による解析や機能アッセイの実施について報告しています。

コロナウイルス(COVID-19の原因となる新型コロナウイルス(SARS-CoV-2)とは異なる、過去のコロナウイルス株)に関する基礎研究には、クロモテック(2020年よりプロテインテックの一部)の「Nano-Trap(ナノトラップ)」シリーズの大ヒット商品であるGFP-Trap®が使用されています。

ウイルスのイメージ画像(画像提供:CDC)

以下の表には、GFP-Trap®が使用されているウイルス研究論文をまとめました。

ウイルス

アプリケーション

PubMed ID / リンク

発表(年)

Abutilon mosaic virus(AbMV)
Pea necrotic yellow dwarf virus(PNYDV)

Geminiviridae
Nanoviridae

Begomovirus
Nanovirus

Co-IP、MS

27693920

2017

Adenovirus

Adenoviridae

-

Co-IP、MS

27307198

2016

Alphacoronavirus

Coronaviridae

Alphacoronavirus

Co-IP

27479465

2016

Cauliflower mosaic virus

Caulimoviridae

Caulimovirus

Co-IP

30840696

2019

Chikungunya virus(CHIKV)

Togaviridae

Alphavirus

Co-IP、MS

29702546

2018

Chikungunya virus(CHIKV)

Togaviridae

Alphavirus

IP、functional assay

https://doi.org/10.1101/2020.01.07.896977

2020

Chikungunya virus(CHIKV)
Semliki Forest virus(SFV)

Togaviridae
Togaviridae

Alphavirus
Alphavirus

Co-IP

31199850

2019

Citrus psorosis virus(CPsV)

Aspiviridae

Ophiovirus

Co-IP

30135122

2018

Cotton leaf curl Multan virus(CLCuMuV)

Geminiviridae

Begomovirus

Co-IP

27315204

2016

Cotton leaf curl Multan virus(CLCuMuV)
Tomato yellow leaf curl virus(TYLCV)
Tomato yellow leaf curl China virus(TYLCCNV)

Geminiviridae
Geminiviridae
Geminiviridae

Begomovirus
Begomovirus
Begomovirus

Co-IP

28244873

2017

Dengue virus(DENV)

Flaviviridae

Flavivirus

Co-IP

27076639

2016

Dengue virus(DENV)
Poliovirus(PV)
Zika virus(ZIKV)

Flaviviridae
Picornaviridae
Flaviviridae

Flavivirus
Enterovirus
Flavivirus

Co-IP、MS

30608919

2019

Ebola virus(EBOV)

Filoviridae

Ebolavirus

Co-IP

29290611

2018

Ebola virus(EBOV)

Filoviridae

Ebolavirus

Co-IP、MS

27786485

2016

Enterovirus

Picornaviridae

Enterovirus

Co-IP

31381608

2019

Guinea pig cytomegalovirus(GPCMV)

Betaherpesvirinae

Cytomegalovirus

Co-IP

28651121

2017

Guinea pig cytomegalovirus(GPCMV)

Betaherpesvirinae

Cytomegalovirus

Co-IP

27387220

2016

Hendra virus V(HeV)

Paramyxoviridae

Henipavirus

Co-IP

29321677

2018

Hepatitis C virus(HCV)

Flaviviridae

Hepacivirus

IP

29352312

2018

Herpes simplex virus(HSV)

Herpesviridae

Simplexvirus

Co-IP

28507315

2017

Herpes simplex virus type 1(HSV-1)

Herpesviridae

Simplexvirus

Co-IP

27852850

2017

Herpes simplex virus type 1(HSV-1)

Herpesviridae

Simplexvirus

Co-IP

https://doi.org/10.1101/810663

2019

Herpes simplex virus type 1(HSV-1)

Herpesviridae

Simplexvirus

Co-IP、MS

https://doi.org/10.1101/729343

2019

Herpes simplex virus type 1(HSV-1)
Vaccinia virus(VacV)

Herpesviridae
Poxviridae

Simplexvirus
Orthopoxvirus

Co-IP、RIP

28636603

2017

Herpes simplex virus type 2(HSV-2)

Herpesviridae

Simplexvirus

Co-IP

30080903

2018

Human cytomegalovirus(HCMV)

Betaherpesvirinae

Cytomegalovirus

Co-IP

27181750

2016

Human immunodeficiency virus(HIV)

Orthoretrovirinae

Lentivirus

Co-IP

26792716

2016

Human immunodeficiency virus 1(HIV-1)

Orthoretrovirinae

Lentivirus

Co-IP

28835492

2017

Human immunodeficiency virus 1(HIV-1)

Orthoretrovirinae

Lentivirus

Co-IP

27560372

2016

Human immunodeficiency virus 1(HIV-1)

Orthoretrovirinae

Lentivirus

Co-IP

31776272

2020

Human noroviruses(HuNoV)

Caliciviridae

Norovirus

Co-IP

31403400

2019

Human papillomavirus(HPV)

Papillomaviridae

-

IP

29045464

2017

Infectious bronchitis virus(IBV)

Coronaviridae

Gammacoronavirus

Co-IP、MS

23637410

2013

Influenza A virus

Orthomyxoviridae

Alphainfluenzavirus

Co-IP

29061883

2017

Influenza A virus

Orthomyxoviridae

Alphainfluenzavirus

Co-IP

28250123

2017

Kallithea virus(KV)

Nudiviridae

Alphanudivirus

Co-IP、MS

30404807

2019

Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus(KSHV)

Herpesviridae

Rhadinovirus

Co-IP

27798559

2016

Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus(KSHV)

Herpesviridae

Rhadinovirus

Co-IP、MS

26811480

2016

Merkel cell polyomavirus(MCPyV)

Polyomaviridae

Alphapolyomavirus

Co-IP

28445980

2017

Nipah virus(NiV)

Paramyxoviridae

Henipavirus

Co-IP

27622322

2016

Plum Pox Virus

Potyviridae

Potyvirus

Co-IP

27301551

2017

Porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV)

Arteriviridae

Porartevirus

Co-IP

30819256

2019

Porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV)

Arteriviridae

Porartevirus

IP

27327135

2016

Pseudorabies Virus

Herpesviridae

Varicellovirus

ChIP

28283558

2017

Rabies virus(RABV)

Rhabdoviridae

Lyssavirus

Co-IP、AP-MS

29084252

2017

Rabies virus(RABV)

Rhabdoviridae

Lyssavirus

Co-IP

26939125

2016

Red clover necrotic mosaic virus(RCNMV)

Tombusviridae

Dianthovirus

Co-IP

28154139

2017

Reptilian orthoreovirus

Reoviridae

Orthoreovirus

Co-IP

https://doi.org/10.1101/761502

2019

Severe acute respiratory syndrome coronavirus(SARS-CoV)

Coronaviridae

Betacoronavirus

Co-IP、ubiquitination/deubiquitination assay、kinase assay

27519799

2016

Tick-borne encephalitis virus

Flaviviridae

Flavivirus

Co-IP

31243132

2019

Tobacco vein banding mosaic virus(TVBMV)

Potyviridae

Potyvirus

Co-IP

28230184

2017

Tomato yellow leaf curl virus(TYLCV)

Geminiviridae

Begomovirus

Co-IP

28946693

2017

Tomato yellow leaf curl virus(TYLCV)

Geminiviridae

Begomovirus

Co-IP

https://doi.org/10.1101/811091

2020

Turnip mosaic virus(TuMV)

Potyviridae

Potyvirus

Co-IP

29593293

2018

Turnip mosaic virus(TuMV)

Potyviridae

Potyvirus

Co-IP

28223439

2017

Vaccinia virus(VacV)

Poxviridae

Orthopoxvirus

Co-IP

28467896

2017

Varicella zoster virus

Herpesviridae

Varicellovirus

Co-IP

https://doi.org/10.1101/2020.03.12.988659

2020

GFP-Trap®を使用した論文は2015年以前にも発表されていますが、本ブログには掲載していません。GFP-Trap®を使用している、その他の論文については製品ページの論文使用実績(Publications)をご覧ください。

プロテインテックのGFP-Trap®は、GFPタグ融合タンパク質の免疫沈降用の多目的に利用可能なツールです。GFP-Trap®は、免疫沈降用ビーズに共有結合した抗VHH抗体(別名:Nanobody®)からなる製品です。GFP-Trap®とその関連製品については、こちら(製品検索)をご覧ください。

Nanobody-Alpaca-Chromotek-Trap

 

抗GFP VHH抗体(別名:Nanobody®)は、GFPタンパク質と極めて安定的に相互作用し、効率的なGFPタグ融合タンパク質の免疫沈降に使用できます。優れた相互作用によって、数多くの異なる免疫沈降条件やプロトコールで調製される様々な生物種由来の細胞ライセートから目的のタンパク質を回収することができます。GFP-Trap®は高い親和性を有し、バックグラウンドの低い結果を得ることができるため、存在量の少ないGFPタグ融合タンパク質も効率的にプルダウンできます。

 

プロテインテックでは、GFP-Trap®のサンプルを無償で提供しています。下記フォームよりご依頼ください。

無料サンプルリクエストフォーム

(※ 国内におけるプロテインテック製品の出荷および販売は、コスモ・バイオ株式会社を通じて行っております。
最寄りのコスモ・バイオ株式会社 代理店をご指定の上、ご依頼ください。)

 

ウイルス画像の引用元:CDCUnsplashより)