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免疫蛍光イメージングでより良い結果を得るためのGFP-BoosterおよびRFP-Booster

ChromoTekの蛍光色素標識済みの抗GFP VHH抗体（Nanobody®）および抗RFP VHH抗体（Nanobody®）を紹介します。

Nano-Booster（ナノブースター）とは？

Nano-Booster（ナノブースター）とは、蛍光タンパク質のシグナルを増強するための蛍光プローブ製品です。Nano-Boosterは、蛍光色素を標識した非常に小型（15kDa）の抗体フラグメントです。この抗体フラグメントは、ラクダ科動物の重鎖抗体（重鎖のみで構成され、軽鎖を持たない抗体）に由来し、VHH抗体（別名：Nanobody®）と呼ばれています（VHH抗体に関する詳細な情報はプロテインテックホームページのこちらの記事をご覧ください）。GFP-Boosterは、CFP、GFP、AcGFP、mClover（Clover A206K）、YFP等の緑色蛍光タンパク質（GFP：Green Fluorescent Protein）と結合する抗GFP VHH抗体（Nanobody®）であり、RFP-Boosterは、mRFP、mCherry、mRFPruby等の赤色蛍光タンパク質（RFP：Red Fluorescent Protein）と結合する抗RFP VHH抗体（Nanobody®）です。各蛍光タンパク質の検証実績と反応性を掲載したリストはこちら（Nano-Boosterに適合する蛍光タンパク質一覧［PDF］）をご覧ください。GFP-BoosterおよびRFP-Boosterは、免疫蛍光染色（IF）に最適化されています。

プロテインテックのNano-Booster & Nano-Label（ナノブースター&ナノラベル）

ChromoTekのGFP-BoosterおよびRFP-Boosterは、マルチプレックス染色を実施する際に、通常の抗体やNano-Secondary（ナノセカンダリー、蛍光標識ナノ二次抗体）と共に使用することができます。GFP-BoosterおよびRFP-Boosterは、複数のAlexa Fluor® 蛍光色素の標識体として販売されています。

  • 共焦点顕微鏡や一般的な蛍光顕微鏡下でのシグナルを増強
  • STORM法を採用した超解像顕微鏡やMINFLUXにも利用可能
  • 常に一定の標識度（DOL）（Nano-Booster 1分子あたり蛍光色素2分子を標識）で高い解像度を実現します。
  • 95%を超える高い標識効率

 

共焦点顕微鏡イメージング（GFP-Boosterを使用したTOM70eGFP発現細胞の免疫蛍光染色、DAPI染色）

Tom70-eGFPを一過性トランスフェクションにより発現させたHela細胞の免疫蛍光染色。緑：GFP-Booster Alexa Fluor® 488（カタログ番号：gb2AF488）。青：DAPI（核）。撮影：共焦点顕微鏡（ルートヴィヒ・マクシミリアン大学ミュンヘン（LMU-Munich）Core Facility Bioimaging部門）、スケールバー：10µm。

 

 

より柔軟な免疫蛍光染色のために、一般的に広く用いられているAlexa Fluor® 色素を標識

  • GFP-Boosterの標識色素：Alexa Fluor® 488、Alexa Fluor® 568、Alexa Fluor® 647
  • RFP-Boosterの標識色素：Alexa Fluor® 568、Alexa Fluor® 647

3種類のAlexa Fluor®の蛍光スペクトル（最大蛍光波長：488nm・568nm・647nm）

 

 

下図はGFP-Booster Alexa Fluor® 488およびRFP-Booster Alexa Fluor® 568を使用したマルチプレックス染色（多重染色）の一例です。

RFP-BoosterおよびGFP-Boosterを使用した、PCNA-mRFPおよびTom70-eGFP一過性発現Hela細胞のワンステップ免疫蛍光染色

PCNA-mRFPおよびTom70-eGFPを一過性トランスフェクションにより発現させたHela細胞のワンステップ免疫蛍光染色。赤：RFP-Booster Alexa Fluor® 568（カタログ番号：rb2AF568）。緑：GFP-Booster Alexa Fluor® 488（カタログ番号：gb2AF488）。撮影：ルートヴィヒ・マクシミリアン大学ミュンヘン（LMU-Munich）Core Facility Bioimaging部門、スケールバー：10µm

 

 

GFP-BoosterおよびRFP-Boosterは、蛍光色素を標識した抗GFP VHH抗体（Nanobody®）および抗RFP VHH抗体（Nanobody®）です。本製品は、GFPおよびRFPのシグナルを安定化、増強、再活性化します。